申請PEI轉染試劑試用裝轉染步驟
材料：質粒DNA指數生長的真核細胞PEI（聚乙烯亞胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI儲存液（100μM）：稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm濾膜過濾,，儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS（pH7.4）：將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,，加入20ml1M的HEPES，調pH值到7.4,，定容至1L,，過濾（0.2μm濾膜）后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?．細胞分盤：通過胰酶消化收集細胞，用適當的完全培養(yǎng)基以4×105至8×105細胞/cm2的密度平鋪細胞于60mm組織培養(yǎng)皿上（根據實驗需要選擇培養(yǎng)皿,，使細胞貼壁后所占總面積達到培養(yǎng)皿面積的70-90％）。根據細胞貼壁情況于含5％CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當細胞貼壁完全后即可開始轉染,。轉染前換入2mL預熱的無血清培養(yǎng)基,。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題，歡迎咨詢上海曼博生物,。如想申請PEI試用裝,，請關注我們的公眾號：Mine-bio，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加,！哪個品牌的PEI轉染試劑質量好？申請PEI轉染試劑試用裝轉染步驟
穩(wěn)定轉染方法：1.接種細胞：轉染前一晚,，用膠原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數（不建議用胰酶）,。調整細胞濃度，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。2.準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,，每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同）。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）,。充分混勻后，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時,，請用圓底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL離心管,。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物,！如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加！?全球PEI轉染試劑試用裝幫助用戶更好地了解PEI轉染試劑的操作流程分子量為25000的線性PEI轉染試劑即Polysciences23966轉染效率比較高.
1.對于某些類型的細胞如HEK-293,、HEK293T,、NIH/3T3和COS細胞,，在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,，可適當降低鋪板密度,，以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,，可適當降低鋪板密度,。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情況下，DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,，但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成,。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性,。4.對大多數細胞來而言,，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化,。更多關于PEI轉染試劑相關產品技術問題,，歡迎咨詢上海曼博生物。?如想申請PEI試用裝,，請關注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關鍵詞“PEI申請”，即可參加,！
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PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,，大量科學家選擇PEIMAX，在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑,。多年以來,，經過眾多業(yè)內人士評審的公開研究和出版文獻表明，在HEK293,、CHO和Sf9系統中可獲得很高的轉染效率，在重組抗體和病毒載體生產中穩(wěn)定性高,，可靠性強,。PEIMAX是一種非GMP等級PEI轉染試劑，適用于基礎科學研究及藥物研發(fā)早期階段,。Transporter5轉染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉染試劑（PEI）衍生物,。由PEIMAX配置而成的即用型無菌試劑，采用0.1μmPES無菌過濾器,，完全消除支原體污染風險,。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,，可無縫過渡到MAXgene用于cGMP生產,。如想申請PEI試用裝，請關注我們的公眾號：Mine-bio,，回復關鍵詞“PEI申請”,，即可參加！轉染效率好的PEI轉染試劑是哪個品牌,？天津高實用性PEI轉染試劑試用裝
MAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉染試劑,。申請PEI轉染試劑試用裝轉染步驟
接種細胞：轉染前，用膠原酶消化細胞并計數（不建議用胰酶）,。調整細胞濃度,，將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿，總體積如表1所示,，每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%,。準備DNA-PEI復合物：DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫,。依據表1所示,，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑,。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉染試劑,。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,，一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中（注意：請勿顛倒添加順序）。充分混勻后,，室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物,。當溶液體積較大時，請用圓底聚丙烯管,，例如Falcon5mL/14mL離心管,。轉染細胞：直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,，去除生長培養(yǎng)基,，替換成無血清培養(yǎng)基，然后滴DNA-PEI復合物,。轉染3h后,，添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。孵育細胞和分析結果：在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細胞至可以分析檢測,。轉染后快7h即可檢測到轉入基因的表達,。請自行確定檢測時間。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物,！近期還可申請PEI轉染試劑試用裝,！申請PEI轉染試劑試用裝轉染步驟
本文來自天津市津南區(qū)同源機械設備租賃中心：http://jiajiaxiang.cn/Article/50d13199818.html
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